雏鸭黄曲霉毒素中毒自然病例的病理学诊断-医学论文

样品的采集与处理对发病雏鸭进行心脏采血。待自然凝固后，3000r/min离心10min，分离血清，4℃保存，以备血清生化指标的测定，所有血清样品均在采集后24h内测定。待采血结束后经颈静脉放血致死，剖检，观察发病雏鸭的大体病变，采取肝脏组织于10％中性福尔马林溶液中固定。 1．2．3血清生化指标测定用半自动生化分析仪测定血清中血糖(GLU)、总蛋白(TP)含量、天冬氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶(AST)的变化。血清葡萄糖为葡萄糖氧化酶法；总蛋白为双缩脲法；天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶均为连续监测法。 1．2．4肝脏组织病理学观察取固定完全的雏鸭肝脏组织。经常规石蜡包埋、切片、H．E染色，光镜下观察病理组织学变化。 1．2．5鸭胚、雏鸭接种试验取病死鸭肝脏，研磨，1：5稀释，加青、链霉素各1000IU/mL，反复冻融3次，3000r/min离心30min取上清液，接种10日龄鸭胚10个，0.2mL/胚，另外用灭菌生理盐水对照接种2个鸭胚。接种1日龄雏鸭10羽，0.3mL/羽。 1．2．6饲料检测采集发病雏鸭使用的饲料样品送华中农业大学饲料检测站检测黄曲霉毒素B1含量。 2结果 2．1发病情况调查结果和I临床症状湖北省随州某种鸭场共有种雏鸭1万余套，自3日龄开始发病。自发病到送检的1周时间内，该批种鸭发病1000只，死亡50只，病死率5％。武汉市新州区某肉鸭场有肉鸭2000只，9日龄开始发病，发病5d，发病600只，死亡60只，病死率10％。湖北省襄樊某肉鸭场有肉鸭3000只，9日龄开始发病，至19日龄，发病1400只，死亡1260只，病死率90％。病鸭表现为食欲减退，生长缓慢、嗜睡呆立，衰弱，步态不稳、跛行，少数病鸭脚和腿由于皮下出血而呈淡紫色。病雏鸭死前常有抽搐，死亡后呈角弓反张现象。 2．2剖检病变主要病变在肝脏，发现肝脏明显肿大，表面粗糙，肝质地较硬，肝表面有白色网格状花纹，胆囊充盈。脾脏明显肿大。外观呈网格状花纹。十二指肠黏膜充血、出血，肾脏肿胀充血。肝实质细胞排列紊乱，肿胀变圆。细胞质内有圆形空泡，发生严重的脂肪变性，肝细胞坏死；汇管区和肝小叶内胆管上皮细胞呈条索状或团块状增生，增生的胆管上皮细胞向肝小叶内伸展。 2．3鸭胚、雏鸭接种实验 10个鸭胚在37℃恒温箱内培养均正常孵化出壳； 10羽雏鸭接种24h、48h、72h后均无死亡，生长亦未受到抑制。体重增重正常。 2．4血清生化检验雏鸭血清生化指标测定结果见表1。 2．5饲料检验经检测饲料中黄曲霉毒素B1含量分别为6.7ug/kg、6.4ug/kg和8.3ug/kg。 3讨论上述鸭场发病雏鸭的主要病变都发生在肝脏，表现为质地较硬，表面粗糙，组织病理学变化为肝细胞脂肪变性，肝组织间质有明显的胆管上皮细胞增生，可以诊断发病雏鸭是黄曲霉毒素中毒。鸭胚及雏鸭的接种实验结果说明该鸭场此次暴发的疾病不是由细菌或病毒所引起的。临床上常用血清丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的活性来鉴别诊断肝病的性质和程度。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时，转氨酶就会由肝细胞释放到血中，引起血中转氨酶升高。本实验测定了发病雏鸭血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的浓度。与正常比较，血清中转氨酶升高，表明肝脏受损。黄曲霉毒素是一组次级真菌代谢产物，在我国饲料检测中以B1计，目前饲料卫生标准仅对黄曲霉毒素B1的安全限量有规定。标准规定肉用仔鸭前期、雏鸭配合饲料及浓缩饲料≤10ug/kg，肉用仔鸭后期、生长鸭、产蛋鸭配合饲料及浓缩饲料≤15ug/kg。发病鸭场饲料黄曲霉毒素B1检测结果均符合国家规定标准，但有研究表明，饲料中含黄曲霉毒素1ug/kg即可引起中毒。动物因种类、性别、年龄、营养状况不同对黄曲霉毒素B1的敏感性不同，最敏感的动物为雏鸭。因此，在实际生产中，对饲料黄曲霉毒素检测的结果只能作为通常情况下的参考值。而不是绝对的量度标准。目前对黄曲霉毒素引起的中毒无有效的治疗方法，重在预防，防止饲料霉变，提高饲料质量意识，切实加强饲料原料及其产品的质量监督和管理是关键。