玉屏风散配方颗粒汤剂与传统饮片汤剂中总多糖含量的比较

摘要：目的：观察比较玉屏风散配方颗粒汤剂与传统饮片汤剂中总多糖含量。方法：采用紫外-分光光度法测定比较同批号等剂量的玉屏风散配方颗粒汤剂和传统饮片汤剂中总多糖的含量，其波长为490nm。结果：以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得标准曲线回归方程：y=0.0707x-0.0004，r=0.9997，葡萄糖浓度在9.22-55.45μg/ml范围内线性关系良好；平均回收率为98.24%，RSD为1.53%，玉屏风散配方颗粒汤剂总多糖含量为134.79mg，玉屏风散传统饮片汤剂总多糖含量为137.76mg。结论：同批号等剂量的玉屏风散配方颗粒汤剂与传统饮片汤剂总多糖含量相当。

关键词：玉屏风散；配方颗粒汤剂；传统饮片汤剂；总多糖含量 

Abstract:Object：To study comparison on content of total polysaccharides in dispensing granules decoction and traditional herbs decoction of yupingfengsan.Method：Comparison on content of total polysaccharides in dispensing granules decoction and traditional herbs decoction of yupingfengsan of same lot number and isodose by using UV spectrophotometry.the wavelength is 490nm. Result: The abscissa was the content of glucose and the ordinate was absorbance value. to obtain the regression equation: y=0.0707x-0.0004，r=0.9997. the content of glucose showed a good linear relationship at a range of 9.22-55.45μg/ml,the average recovery was 98.24% and RSD was 1.53%.the content of glucose in dispensing granules decoction of yupingfengsan is 134.79mg. the content of glucose in traditional herbs decoction of yupingfengsan is 137.76mg. Conclusion: Content of total polysaccharides in dispensing granules decoction and traditional herbs decoction of yupingfengsan of same lot number and isodose were equivalent.

Keywords:yupingfengsan; dispensing granules decoction ; traditional herbs decoction; content of total polysaccharides

汤剂作为传统中药剂型，虽具有吸收快、疗效好、能随证加减等优点，但亦有服用携带不便、质量标准不明等缺点。中药配方颗粒是以符合炮制规范的优质药材为原料，采用现代高新技术提取、浓缩、制粒而成的产品系列，具有可直接冲服、使用及携带方便等优点，在临床使用逐渐增多。玉屏风散，由黄芪、防风、白术(炒)三味药组成。功能益气、固表、止汗，用于表虚不固，自汗恶风，广泛用于治疗以体虚易感病人，用于预防、治疗病毒引起的感冒等呼吸系统疾病以及免疫功能紊乱为主的多种病证，也可作为增强机体免疫力的保健药应用[1-3]。为给中药配方颗粒替代中药饮片提供依据，本研究采用紫外-分光光度法将玉屏风散配方颗粒汤剂与传统饮片汤剂中总多糖的含量进行了对比研究以说明两种剂型总方中整体化学信息的一致性。

1材料

1.1仪器  

TU-1000型紫外可见分光光度计(北京市通用仪器设备公司)；TG16-WS台式高速离心机(湖南赛特湘仪离心机仪器有限公司)；MM-2型快速旋涡振荡器(江苏省姜堰市沈高康健生化器具厂)；KQ-100型超声清洗器(昆明市超声仪器有限公司)；BP211D型电子天平（德国Sartarius公司）；GSY-8型电热恒温水浴锅（北京医疗设备厂意成公司）。

1.2试药与试剂

玉屏风散饮片、配方颗粒（由同批次相应饮片制备而成），均由广州一方制药有限公司提供，由山西中医学院中药鉴定教研室张朔生教授鉴定；葡萄糖对照品购自中国药品生物制品检定所；试验用水为自制去离子水；无水乙醇、苯酚和浓硫酸均为分析纯。

2方法与结果

2.1处方、配方颗粒及汤剂制备

2.11处方组成：黄芪30g，白术30g，防风15g。

2.12黄芪配方颗粒制备：取黄芪饮片2kg第1次加水煎煮60min，第2次加水煎煮30min，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.30(50℃)的清膏，真空干燥，得干浸膏，粉碎，以95%乙醇制粒，干燥，即得约800 g颗粒。

2.13防风配方颗粒制备：取防风饮片1kg，第1次加水，第2次加水，均煎煮30min，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.30(50℃)的清膏，真空干燥，得干浸膏，粉碎，以95%乙醇制粒，干燥，即得约400g颗粒。

2.14白术配方颗粒制备：取白术饮片2kg，第1次加水煎煮60min，第2次加水煎煮30min，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.30(50℃)的清膏，真空干燥，得干浸膏，粉碎，以95%乙醇制粒，干燥，即得约800g颗粒。

2.15传统饮片汤剂制备：按处方比例称取以上三味药材，加水300ml，煎煮45min，滤过，药渣加水240ml，煎煮30min，滤过，合并2次滤液，调整体积至250ml备用。

2.16配方颗粒汤剂制备：称取与药材相当量的三味配方颗粒，混合，加入80～100℃左右的水200ml，搅拌溶解，冷后加水至250ml备用。

2.2新蒸苯酚溶液配制：取苯酚试剂加热融解，置圆底烧瓶中采用重蒸镏法收集185℃的馏分，重复三次得到较纯的苯酚溶液，趁热精密吸取25ml溶液于500ml棕色容量瓶中，加水稀释至刻度，振摇混匀，置冰箱避光保存[4]。

2.3供试品溶液的制备：精密量取玉屏风散传统饮片汤剂和配方颗粒汤剂1ml于10ml试管中，滴加无水乙醇4ml，边滴边置于快速漩涡振荡器上振荡，密封，冷藏放置24h，取出，在2500rpm离心15min，弃去上清液，沉淀加入80％乙醇2ml，充分混合，在2500rpm离心15min，弃去上清液，沉淀加入无水乙醇2ml，充分混合，离心，弃去上清液，反复处理三次，沉淀用热蒸馏水溶解，放冷。然后置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，振摇混匀，作为全方浓多糖溶液。滤过，精密吸取1～2ml全方浓多糖溶液，置10ml容量瓶中，加水稀释至刻度，即得。

2.4标准溶液制备：精密称取葡萄糖对照品0.1003g置于100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得葡萄糖标准溶液。

2.4多糖含量测定

①波长的选择：精确量取葡萄糖标准溶液0.6ml置于2ml容量瓶，加水稀释至2ml，另取供试品溶液2ml置于25ml容量瓶，以下步骤按2.3项下操作，通过紫外-可见分光光度计于200～600nm波长范围内扫描，标准溶液的最大吸收波长为488nm，供试品溶液最大吸收波长为491nm。故确定490nm为检测波长。

②标准曲线制作：分别取1.5ml，3ml，4.5ml，6.0ml，7.5ml，9.0ml标准溶液至10ml容量瓶，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，各取0.6ml置于25ml容量瓶中，加入新鲜配制的5%苯酚溶液1.2ml混合均匀后，迅速加入6ml浓硫酸，加水稀释至刻度，充分混合，室温放置30min，于TU-1000型紫外可见分光光度计上490nm处测定吸光度，随行空白对照。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得标准曲线回归方程：y=0.0707x-0.0004，r=0.9997，葡萄糖浓度在9.22-55.45μg/ml范围内线性关系良好。

③精密度试验：精密量取6份葡萄糖标准溶液，每份3ml，按②项下操作，测定吸光度值，得RSD为0.93% (n=6)，显示该比色法精密度良好。

④稳定性试验：将同一标准溶液按②项下操作，分别于显色后0min，30min，60min，90min，120min，150min测定吸光度值，得RSD为0.93% (n=6)，显示该比色法在150min内稳定性良好。

⑤加样回收率试验：将已知含量的样品多糖（玉屏风散饮片）配成样品溶液6份，分别加入高低两种浓度葡萄糖溶液混合成供试液，按②项下操作，测定吸光度并计算回收率。结果见表1。

表1   加样回收率试验结果（n=6）

2.5样品测定    

分别精密吸取玉屏风散传统饮片汤剂和配方颗粒汤剂溶液2ml，从“加入5%的苯酚溶液1.0ml至在490nm波长处测定吸光度”按2.3和②项下操作，并按照相应的稀释倍数计算多糖含量。结果见表2。

表2   玉屏风散传统饮片与配方颗粒汤剂多糖含量测定结果

3  小结

本实验用硫酸-苯酚法测定多糖含量，方法简便，快速，供测定用葡萄糖对照品溶液及全方汤剂供试品溶液在400～600nm波长范围内扫描度，均在490nm处有吸收峰，故选择490nm为测定波长。实验比较了同一批玉屏风散传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂中总多糖的含量，结果表明，两种汤剂中总多糖含量相当，说明两种剂型总方中整体化学信息具有一致性，为玉屏风散配方颗粒替代传统饮片使用提供了科学依据。

参考文献：

[1]林琦，陆阳.黄芪属植物皂苷类成分研究进展[J].国外医药：植物药分册,2002,24:143-146.

[2] 徐晓清，米雷敏，黄卓伟.玉屏风散药理研究及临床应用进展[J].中医药信息，1999,2:16-18.

[3] 姚实林.玉屏风散的药理研究进展.安徽中医学院学报，1999,18(5):86-88.

[4]细敏，唐小异，刘胜姿等.白术多糖葡萄糖的含量测定[J].湖南师范大学学报(医学版)，2004，1(1).